回歸傳統橫向捲軸玩法,首度加入最多四名玩家一起合作闖關,從此玩瑪俐歐不再是單獨一人,可以和路易等人一同冒險,強化多人同樂的樂趣。此代加入許多元素,讓玩家能夠互相競爭與合作,你可以舉起同伴並將他們丟出,藉此保護他們避開危險。此外,廣受歡迎的耀西也再度登場,除了提供角色騎乘的功能外,耀西還能伸出它們的舌頭將敵人、甚至是同伴給吞到肚子裡,非常搞笑唷!
如同 《超級瑪俐歐兄弟 3》中職業變身系統的概念,《新超級瑪俐歐兄弟 Wii》也加入了更多的新道具,例如螺旋槳頭盔可以讓瑪俐歐的滯空能力大幅強化,甚至一口氣直衝天際;另外,也可以變身為企鵝,以不同於火球的冰塊攻擊將敵人凍結。